微生物生長以及測量方法
2016-06-06 11:18:07
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我們所說的微生物其實(shí)就是指一切肉眼看不到或看不清楚，因而需要借助顯微鏡觀察的微小生物。微生物包括原核微生物（如細(xì)菌）、真核微生物（如真菌、藻類和原蟲）和無細(xì)胞生物（如病毒）三類。
微生物的基本單位是細(xì)胞，在合適的環(huán)境條件下細(xì)胞會生長，生長是指細(xì)胞物質(zhì)有規(guī)律、不可逆增加的過程，主要表現(xiàn)有機(jī)體的細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加。也就是說微生物開始大量繁殖的起始，其繁殖定義為：微生物生長到一定階段，由于細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)的復(fù)制和重建，導(dǎo)致產(chǎn)生一個新的細(xì)胞個體，即引起細(xì)胞個體數(shù)量增加的整個生物學(xué)過程。
總而言之，生長是一個逐漸發(fā)生的量變的過程，是繁殖的基礎(chǔ)；繁殖是一個質(zhì)變的過程，是生長的結(jié)果。
那么如何測定生長繁殖，我們可以通過以下三個實(shí)驗(yàn)方法可得：個體計(jì)數(shù)、群體重量測定以及群體生理指標(biāo)測定。
一、測生長量
測生長量的方法很多， 常見的有下面幾種：
（一）直接法
1、測體積：粗放型，在刻度離心管中測沉降量
2、測干重：精確型，離心法和過濾法獲得菌體細(xì)胞
可用離心法或過濾法測定，一般干重為濕重的10%～20%。
（二）間接法
1、比濁法：用分光光度法對無色的微生物懸浮液進(jìn)行測定，一般選用450～650nm波段。
（三）生理指標(biāo)法
微生物的生理指標(biāo)，如氮、碳、DNA、ATP等物質(zhì)的含量，呼吸強(qiáng)度、耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。以上指標(biāo)可以借助儀器測量。
二、計(jì)繁殖數(shù)
測定繁殖就是要一一計(jì)算各個體的數(shù)目。
1、直接計(jì)數(shù)法（全數(shù)）：指采用計(jì)數(shù)板，在光線顯微鏡下直接觀察微生物細(xì)胞并進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法。缺點(diǎn)是不能區(qū)分死菌與活菌。但可以通過染色后活菌計(jì)數(shù)可以區(qū)分活菌與死菌。
2、間接計(jì)數(shù)法（活菌數(shù)）：這是一種依據(jù)活菌在液體培養(yǎng)基中會使其變混或在固體培養(yǎng)基上（內(nèi)）形成菌落的原理而設(shè)計(jì)。
（傳統(tǒng)法）平板菌落計(jì)數(shù)法：此法適用于各種好氧菌或厭氧菌。該法相對精確，但對實(shí)驗(yàn)人員要求比較高，否則難以得到正確的結(jié)果。
目前市場上出現(xiàn)快速、微型用于菌落計(jì)數(shù)的測菌片。原理是利用加在培養(yǎng)基中的活菌指示劑TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑），它可使菌落在很微小時就染成容易辨認(rèn)的玫瑰色。該法簡便，但比較粗放。
通過以上的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，我們可以了解單位時間里微生物數(shù)量或生物量的變化，可以客觀反映微生物生長的規(guī)律，從而進(jìn)一步評價外界培養(yǎng)條件對微生物生長的影響，以及評價不同殺菌劑對微生物產(chǎn)生抑殺作用的效果。
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